欢迎访问有限公司官网

高质量的服务,专注于

建网页广阔资源优化策略服务更高效

基因过表达的原理 步骤 应用?(“基因过表达”的原理步骤和应用是什么?)

作者:佚名      发布时间:2021-09-14      浏览量:18823
基因过表达的原理 步骤 应用?顾名思义,基因过表达是将某个基因大量表达的过程。这个过程可以是在基因原本所在的细胞中,也可以是在其它表达系统中进行。其基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量

基因过表达的原理 步骤 应用?


顾名思义,基因过表达是将某个基因大量表达的过程。这个过程可以是在基因原本所在的细胞中,也可以是在其它表达系统中进行。其基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。
现在有很多成熟的表达系统用于基因过表达,常用的包括:大肠杆菌表达系统,酵母表达系统,昆虫表达系统,哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统(无细胞体系)。虽然这些系统各不相同,但过表达的基本步骤相似。
1. 构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类

“基因过表达”的原理步骤和应用是什么?


基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产物的过表达。
基因过表达的步骤是:
1,构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同
2,将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。对于昆虫表达系统,构建的质粒还需要先转座成为杆状病毒基

如何构建一个基因的过表达载体


当拿到一个基因的DNA片段后,就需要把它导入一个载体,一方面长期保存。另一方面也需要以载体为媒介将基因导入受体细胞中。基因表达载体的构建是基因工程的核心。
常用的载体有细菌质粒,噬菌体和动植物病毒。其中质粒载体最常用。所谓载就是一个很长的环状DNA,携带一些基因,可以导入细菌中自我复制,也可以从细菌中提取出来改造。
现在我们就需要把SUN片段连到一个载体,用VectorNTI打开,研究一下用哪个酶处理,这个载体需要用Sma1这个酶切开,然后用SUN连上,替换切下来的ccdb,这里要用到两个酶,一个